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elisa试剂盒厂家介绍试剂盒洗板方法
点击次数:309 发布时间:2018-07-23
   elisa试剂盒厂家介绍试剂盒洗板方法
  elisa试剂盒可谓是免疫学反应应用到科研出产中广泛敏捷的技术手段。elisa试剂盒厂家分析原理:
  elisa试剂盒是基于标准的双抗夹心酶联免疫分析技术。将小鼠E选择素特体包被96孔小鼠E选择素检测抗体为生物素标记抗体试验样品和生物标记的检测抗相继加入到96孔中,然后洗涤平板。生物素-HRP加入96孔中,未与生物素标检测抗体结合的,被洗涤缓冲液洗掉HRP的底物TMB可与HRP(辣根过氧化物酶)发生酶促反应。TMB被HRP催化后变成蓝色物质,在加入酸性终止液后变为黄色。黄颜色的深浅与小鼠E选择素样品被捕获的量成正比。
  酶联免疫测定方法是以抗原抗体间的特异反应为基础的,其与生化的化学反应有着本质的区别,并且因为标记物犹如位素、酶、荧光素、微量元素、发光物质等的掺人,酶联免疫测定技术从低敏捷的免疫沉淀和免疫凝集反应进入到了高敏捷的放射免疫、酶免疫、荧光免疫和发光免疫测定时代,可见酶联免疫测定更多的是用于生物活性物质的微量测定。
  从理论上说,一种生物或生理活性物质,只要有办法得到其特异的抗体,就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。而在血站,HBsAg,抗HCV,抗HIV和梅毒抗体等标志物的检测,哪怕是1%的错误,对将要接受输血的特定患者来说,就是100%的灾害。可见,酶联免疫测定的质量控制有多么重要。近期,在电视、报纸等媒体中,常可见到一些有关医患纠纷的报道,其中一些就与酶联免疫测定有关,如输血后丙肝病毒、艾滋病毒感染的发生,性病检测的假阳性等。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定技术来测定。
  由于elisa试剂盒具有的特异性,抗原抗体的结合发生在抗原的决定簇与抗体的结合位点之间。那么elisa试剂盒洗板方法有以下两点。
  1.手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
  2.自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
  elisa试剂盒的样品采集方法,是收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。elisa试剂盒标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
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